hilic色谱柱使用注意事项

在使用HILIC（亲水作用液相色谱）色谱柱时，需要注意以下事项：

色谱柱的平衡

使用50倍柱体积的50/50乙腈/水相缓冲溶液（缓冲液最终浓度为10mM）平衡新色谱柱。

在开始进样前，用20倍柱体积的起始流动相平衡色谱柱。

进行梯度分析时，进样间隔需要用10倍柱体积起始流动相平衡色谱柱。

流动相的选择

流动相中至少保持5%的极性溶剂（如水、甲醇或3%甲醇/2%水相缓冲液等），以保证固定相被水浸润。

至少保持40%的有机溶剂（如乙腈）。

避免使用磷酸盐缓冲溶液体系，因为可能会在HILIC模式下析出。

使用甲酸铵或乙酸铵作为缓冲液比甲酸或乙酸具有更好的重现性。

如果必须使用流动相添加剂如甲酸，建议使用0.2%的浓度。

保持流动相或梯度中缓冲系统的浓度为10mM以获得最佳峰形。

进样溶剂

尽量使用100%乙腈溶解样品进样，避免使用水配制样品溶液。

如果使用其他溶剂，选择较弱的HILIC溶剂如乙腈、甲醇、异丙醇等。

柱的保存

如果四天之内不使用色谱柱，保存在95%乙腈中。

避免将色谱柱保存在含有缓冲盐的流动相中，如果必须保存，先用10倍柱体积的HPLC级水清洗，然后换上95%乙腈保存。

其他注意事项

柱子的pH操作范围为1~9，操作温度上限通常为45℃。

避免在极端pH、压力和温度条件下运行色谱柱，以延长其使用寿命。

定期清洗色谱柱以保持其性能稳定。

遵循上述注意事项可以帮助您更有效地使用HILIC色谱柱，并获得更好的分离效果。

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